25羥基維生素D3ELISA試劑盒（種屬：小鼠）

25羥基維生素D3ELISA試劑盒（種屬：小鼠）

試劑盒名稱	25羥基維生素D3（25（OH）D3）ELISA試劑盒
規(guī)格	48T/96T
品牌	RENJIEBIO
檢測方法	ELISA酶聯(lián)免疫法
檢測波長	450nm
樣本	血清、血漿、組織、細(xì)胞上清液等
樣本體積	50~100ul
研究領(lǐng)域	神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)等
使用范圍	僅用于科研實(shí)驗(yàn)
保存	2~8℃，避光保存

25羥基維生素D3ELISA試劑盒（種屬：小鼠）流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。　
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?br />（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?br />（6）洗板，同（4）。　
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?！?br />（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！?br />（9）洗板，同（4）?！?br />（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！?br />（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！?br />（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

一、高效、靈敏、特異的抗體；

二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；

五、*，質(zhì)量保證，zui大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算

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