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ELISA試劑盒重點:?ELISA試驗中緩沖溶液等試劑的配方

更新時間:2018-02-27      瀏覽次數(shù):1630

 

ELISA試劑盒重點:?ELISA試驗中緩沖溶液等試劑的配方

ELISA試驗中是以抗原和抗體的免疫反應(yīng)為根底,ELISA試劑以及各種溶液如何裝備?上海晶抗技術(shù)教師將ELISA試驗,各種ELISA裝備辦法匯總?cè)缦拢?/span>
(1)ELISA試驗包被緩沖液
(2)ELISA試驗洗刷緩沖液
(3)ELISA試驗稀釋液;
(4)ELISA試驗停止液
(5)ELISA底物緩沖液
(6)ELISA試驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運用液
(7)規(guī)范品稀釋液。
試劑配方:
a, ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
b, ELISA試驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)運用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5)   10ml
0.75%H2O2                           32μl
c,規(guī)范品稀釋液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,
加去離子水約800mL充沛拌和溶解,然后參加濃鹽酸或許氫氧化鈉調(diào)pH至7.2-7.4,zui終定容到1L.濃度為10mmol/L
d,ELISA試驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3 2.93克
加蒸餾水至1000ml
e, ELISA試驗洗刷緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸餾水至1000ml
f, ELISA試驗稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗刷緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗刷液配成5~10%運用。
g, ELISA試驗停止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴參加濃硫酸(98%)21.7ml。
h,ELISA試驗封閉液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗刷緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。為了確保ELISA試驗的準確性,試驗操作中參加的緩沖液和各組分一定要準確,將洗刷液參加酶標板中的時分避免參加的試劑混入另外一個酶標孔,謹防穿插污染。

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