果糖-1,6-二磷酸（FDP）測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

果糖-1,6-二磷酸(FDP)測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

產(chǎn)品說(shuō)明： 果糖 1,6-二磷酸（fructose-1,6-diphosphate, FDP）是糖酵解過(guò)程中的一種重要的中間產(chǎn)物，對(duì)多種酶具有調(diào)節(jié) 作用，具有改善細(xì)胞能量代謝、增加能量利用、抗心律失常及抗組織過(guò)氧化等作用，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)藥。

醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸裂解，產(chǎn)物與 2,4-二硝基苯肼在酸性介質(zhì)中反應(yīng)生成 2,4-二硝基苯腙，在堿性溶液 中呈紅棕色，在 540 nm 處有特征吸收峰

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品： 可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰 和蒸餾水、EP管。

樣本處理 1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液一）加入提取 液一，冰浴勻漿后于4℃，12000g離心10min，取0.8mL上清液，再加入0.16mL提取液二，4℃，12000g離心10min 后取上清待測(cè)。 2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）：提取液一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液 一）加入提取液一，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；于4℃，12000g 離心10min，取0.8mL上清液，再加入0.16mL提取液二，4℃，12000g離心10min后取上清待測(cè)。 3. 血清（漿）：取100μL血清（漿）加入1mL提取液一，4℃，12000g離心10min，取0.8mL上清液，再加入0.16mL提取液二，4℃，12000g離心10min后取上清待測(cè)。