測定意義:AI的適pH為3~5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI(B-AI)兩種類型。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中,適 pH 為4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。
測定原理:NI催化蔗糖分解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性
需要的儀器,耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
產品說明: 蔗糖轉化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根 據適 pH,將高等植物 Ivr 分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。NI 主要存在于細胞質中,負 責分解細胞質中蔗糖為果糖和葡萄糖。 NI 催化蔗糖分解產生還原糖,進一步與 3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在 540nm 有特征 光吸收,在一定范圍內 540nm 光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算 NI 活性。
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。