魚皮質(zhì)醇(COR)ELISA檢測試劑盒靈敏度值實驗室
英文名稱:Fish Cortisol ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:50 pg/mL – 1600 pg/mL
zui低檢測限:10 pg/mL
應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)
實驗原理:
將目標包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入品或標本,其中的目標連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標,將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
試劑盒組成 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
---|---|---|---|
微孔酶標板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標準品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
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